|
雙熒光素酶檢測
Luciferase報告基因系統(tǒng)是以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fireflyluciferase)活性的一種報告系統(tǒng)。熒光素酶報告基因?qū)嶒灒╨uciferase assay）是檢測轉(zhuǎn)錄因子和其靶啟動子中的特異順序結(jié)合以及miRNA與靶序列結(jié)合的重要手段,。
信諾金達主要提供2個方面的熒光素酶驗證：
啟動子分析實驗： 轉(zhuǎn)錄因子的DNA結(jié)合域和順式作用元件實現(xiàn)共價結(jié)合,，通過測定兩種熒光素酶的活性比值獲得轉(zhuǎn)錄因子是否與啟動子結(jié)合。
miRNA與靶標基因的相互驗證：通過測定兩種熒光素酶的活性比值獲得miRNA對靶基因調(diào)控作用的結(jié)果,。
由于miRNA主要通過作用于靶基因的3’UTR起作用,，可以將目的基因3’UTR區(qū)域構(gòu)建至報告基因luciferase的后面， 通過比較過表達或者干擾miRNA后,，報告基因表達的改變（監(jiān)測熒光素酶的活性變化）可以定量反映miRNA對目的基因的抑制作用,；結(jié)合定點基因突變等方法進一步確定miRNA與靶基因3’UTR的作用位點。
啟動子分析實驗
客戶提供:
基因的名稱,、細胞株
我們提供:
1.啟動子預測
2.啟動子熒光素酶報告載體構(gòu)建
3.雙熒光素酶檢測
4.完整的實驗報告（包含載體構(gòu)建序列,、引物設計,、載體圖譜、載體測序報告,、雙熒光素酶檢測報告）
miRNA與靶標基因的互作驗證
客戶提供:
miRNA名稱,、靶基因名稱、細胞株
我們提供:
1.miRNA與靶基因預測
2.雙熒光素酶報告基因野生型載體構(gòu)建
3.雙熒光素酶報告基因突變型載體構(gòu)建
4.雙熒光素酶檢測
5.完整的實驗報告（包含載體構(gòu)建序列,、引物設計,、對應靶位點、載體圖譜,、載體測序報告,、雙熒光素酶檢測報告）
啟動子載體圖譜和熒光素酶作用原理
|
