|
背景說明
熒光素酶（Luciferase）是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,，來自于自然界能夠發(fā)光的生物。目前,，以北美螢火蟲（Photinus pyralis）來源的熒光素酶基因應用的最為廣泛,。利用熒光素酶與底物結合發(fā)生化學發(fā)光反應的特性，把感興趣的基因轉錄的調控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因的上/下游,，構建成熒光素酶報告質粒,。然后轉染細胞，經(jīng)適當刺激或處理后裂解細胞,，測定熒光素酶活性,。通過熒光素酶活性的高低判斷刺激前后或不同刺激對感興趣的調控元件的影響。
服務流程:
實驗材料確認—重組質粒制備—材料選擇—轉化/染—裂解細胞—熒光檢測—數(shù)據(jù)分析
此檢測適用于：
1,、啟動子結構分析：將啟動子區(qū)域序列（通常2k左右）進行分段截短,，或對特定位點進行突變，再分別構建入熒光素酶報告載體,，檢測其啟動子活性,。
2、啟動子SNP分析：一些基因的啟動子區(qū)域存在單核苷酸多態(tài)性,，可運用螢光素酶報告系統(tǒng)分析其相對活性,。
3、驗證特定轉錄因子同其調控序列的作用：將該序列（通常為啟動子區(qū)域）插入報告基因載體,，同時在實驗細胞中共轉其轉錄因子,，可分析轉錄因子是否提高螢光素酶活性。
4,、驗證啟動子活性：將待測啟動子構建至熒光素酶基因的上游,，檢測啟動子的活性。
客戶提供:
提供轉錄因子/啟動子的核酸序列或登錄號,。
交付內(nèi)容:
1,、重組載體的全序列信息和注釋信息；
2,、重組載體的酶切圖譜,；
3、重組載體的測序結果,；
4,、重組載體：一份質粒、一份大腸桿菌菌液（25%甘油菌）,；
(上述4點是由我司構建載體,。)
5.完整的實驗報告,含3組雙熒光酶活圖片。
|
