|
端粒檢測
端粒是位于真核生物染色體末端特殊DNA序列與特定蛋白質(zhì)形成的復合體，在細胞分裂過程中避免染色體的末端融合和錯誤降解，以維持染色體的結構完整與穩(wěn)定。端粒DNA由大量簡單的串聯(lián)重復序列組成，由端粒酶合成，在個體的生長發(fā)育過程中會發(fā)生長度改變、重復序列改變和重排等變化。
端粒長度是反映細胞狀態(tài)的一項重要指標，檢測端粒長度的方法有多種，其中Southern Blot是最常用的方法，Southern Blot操作簡便、成本較低，能很直觀的反應端粒長度。信諾金達的Southern Blot平臺能為您提供****的端粒檢測服務。
服務要求
1、待雜交目標基因序列和含有待雜交基因的陽性質(zhì)粒，我們會依據(jù)Southern blot實驗要求重新選擇全長或部分區(qū)域作為探針序列，使用PCR法標記地高辛探針。
2、待雜交的高質(zhì)量DNA樣品質(zhì)量至關重要，決定實驗的成敗，請確保DNA抽提質(zhì)量，盡量采用進口試劑盒提取或委托信諾金達提取。
A、基因組DNA檢測：OD260/OD280=1.8-2.0，濃度大于0.3μg/ul，雜交需模板DNA約60 μg/泳道/次；
B、請?zhí)峁┗蚪MDNA檢測圖片，要求無降解，無蛋白污染；
C、檢測樣品低溫運輸至公司。
3、客戶如果無法提供高品質(zhì)的基因組DNA樣品，信諾金達可以幫助制備可用于Southern Blot檢測的DNA樣品，客戶提供樣品要求如下：
A、菌液：不低于500ul，冰袋或者干冰運輸
B、組織：總量不小于2g,干冰運輸
C、細胞：提供新鮮的細胞即可，盡量不要使用鹽溶液沖洗
4、請注明基因組DNA酶切方案，如果項目中需要用到非常規(guī)的限制性內(nèi)切酶，需額外加收酶切費用或有客戶提供相應的限制性內(nèi)切酶。
端粒檢測實驗基本流程
1.基因組DNA提取
2.基因組DNA酶切消化
3.DNA限制酶切消化后產(chǎn)物
4.瓊脂糖凝膠電泳
5.轉膜
6.固定
7. DIG探針標記；
8. Southern雜交；
8. 曝光顯色；
9. 提交電子版檢測報告，包括詳細操作程序和實驗結果等。
Southern Blot服務交付文件
信諾金達負責對客戶提供樣品進行DIG探針標記與Southern雜交檢測技術服務，最終提供檢測報告及檢測圖片
1、DNA樣品檢測報告（實驗樣品不返還，請注意保留備份）
2、標準實驗流程報告
3、southern blot實驗結果檢測報告
4、如果是實驗有額外的要求，請?zhí)崆爸码娀蜞]件說明
實驗范例圖片：
|
